细胞信息

细胞简介

人胚肾细胞株293插入SV40 T-抗原基因后产生的高转染效率的衍生株称为293T。该细胞最初的名字293tsA1609neo，携带SV40复制序列，被广泛用于逆转录病毒生产、基因表达和蛋白表达。

运输和保存

1．1 mL冻存管包装干冰运输，收货后-80℃冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏。若发现干冰已经挥发干净、冻存管盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。

2．T25瓶培养的细胞常温发货，收到后按照细胞接收后的处理方法操作。

培养瓶细胞接收后的处理

1．收到常温细胞后，请及时检查外包装是否完好，细胞培养瓶是否损坏、漏液，培养基是否浑浊，并拍照记录，如有发生，请及时与我们联系。

2．镜下观察有无微生物污染现象，并拍照记录，如有发生，请及时联系我们。

3．75%酒精擦拭瓶壁，拆下封口膜，放入37℃，5% CO₂培养箱中静置3-4 h，以稳定细胞状态。

4．显微镜下观察细胞状态，拍照记录，10倍和20倍镜各2-3张留存，作为售后依据。

5．贴壁细胞收货脱落：293T细胞贴壁能力弱，收货如有大面积脱落的细胞团为正常现象。若细胞在快递运输途中因振动脱落，先将培养瓶放入37℃，5%CO₂培养箱中静置3-6 h，让少数脱落的细胞可再附着生长。若仍有脱落聚集的细胞，则收集细胞悬液，1000 rpm离心5 min；0.5 mL胰酶重悬沉淀，37℃消化1-2 min左右；加入5 mL完全培养基终止消化；1000 rpm，离心5 min，弃上清，用5 mL完全培养基（补加1-5% FBS，促进贴壁）重悬沉淀，接种于新的培养瓶内；待细胞完全贴壁后，培养观察；之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。

6．贴壁细胞收货后的处理、培养和传代：在显微镜下观察细胞生长状态，若细胞生长密度在60%以下，可去除培养瓶中的运输用培养基（灌液培养基），加入新配制的完全培养基，置于培养箱中继续培养。若细胞生长密度达80%-90%以上，可以对细胞进行传代处理。有的原代细胞不可传代，请根据细胞情况决定。

7．悬浮细胞收货后的处理和培养：将培养瓶中的液体全部转移入离心管中，1000 rpm，离心5 min，弃上清，加培养基重悬细胞，并转移入新的培养瓶/皿中培养。

8．运输用的培养基（灌液培养基）不能再用来培养细胞，请换用合适的新鲜培养基来培养细胞。

冻存细胞接收后的处理

收货后-80℃冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏。

细胞复苏：将含有1 mL细胞悬液的冻存管置于37℃水浴中迅速摇晃解冻，回温后喷以75 %酒精并擦拭之，移入无菌操作台内。将冻存管中细胞加入到含4-6 mL完全培养基的离心管中混合均匀。1000 rpm离心3-5 min，弃去上清液，完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入T25培养瓶/6 cm培养皿中，培养箱中孵育。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。

培养信息